享有“上帝之手”“基因剪刀”之称的，基因编辑技术“切割”工具CRISPR-Cas9从面世的现在，整个路途可谓一波三折。CRISPR中的Cas9蛋白，若它受到人体自身免疫系统的威胁，那么基因治疗可能就会失灵。近期发表在《自然·医学》上的一项研究表明，大部分人对Cas9蛋白存在预先免疫力。

　　研究中，48名健康血液样本暴露于Cas9蛋白酶中，这种酶来自一种名为酿脓链球菌的细菌，结果96%的人对Cas9具有T细胞免疫力，85%的人血液中预先存在针对它的抗体。基因编辑技术CRISPR-Cas9貌似再次遭遇挑战。

　　自2012年CRISPR-Cas9技术被发现以来，应用潜力大到令人咋舌，而CRISPR-Cas9的几位研究先驱也相继得到了引文桂冠奖的垂青，专利归属也成为利益集团的争夺焦点。

　　2017年5月30日，期刊《NatureMethods》刊登的文章指出，CRISPR-Cas9技术会导致小鼠体内数百个非目标突变，对CRISPR的脱靶性问题提出了质疑。人们认为该论文数据不充分、实验设计不科学。

　　此后， 北京时间2018年1月5日，斯坦福大学医学院的研究小组发表了一篇未经同行评议的文章，记录了数十人的血液测试，结果65%人具有针对酿脓链球菌Cas9的抗体，但无法检测出针对该酶的T细胞活性。该研究发现“任一 Cas9 同系物还可能对患者产生显著的毒性”。

　　如今的这篇文章更加强有力地证明了这一结论。柏林Charité大学医学院的业内领军人物表示，最初他对96%的调查结果感到十分惊讶，但这是有道理的，我们都经历过酿脓链球菌的多次感染，甚至它可能已经定植于我们体内了，产生免疫。

　　这个预先免疫反应，在其它一些体外项目中不存在。对于体内计划，Intellia Therapeutics公司目前正在尝试使用脂质纳米颗粒(LNP)将CRISPR递送到肝脏，能够避免T细胞免疫反应的CRISPR系统。该项研究目前已经到了动物实验阶段，没有发现T细胞介导的Cas9细胞毒性表达的迹象。

　　大家别慌，虽然人体Cas9的预先免疫力比脱靶效应更令人担忧，但预先免疫力的问题是有办法避免的，可以通过修饰Cas9蛋白或使用Cas9直系同源物来规避这一问题。

　　免疫反应是在基因治疗领域是长期存在的问题，使用其它DNA内切酶的方案或许可行，但来自人体常接触细菌的Cas酶，比如Cpf1酶依然会出现免疫反应，所以需要从不会感染人类的细菌中寻找Cas9。让我们拭目以待，未来预先免疫问题被攻克。